Dícese de la línea situada en el centro de la zona H de una sarcómera muscular. Su nombre deriva de la palabra alemana «mitteline», es decir, línea media. La línea M contiene al menos tres proteínas: proteína M, que colabora en la disposición regular del filamento grueso; la miomesina, que forma un punto de anclaje fuerte para el filamento elástico de titina; y la M-creatín-cinasa, que se localiza cerca de la cabeza de miosina y cataboliza la formación de ATP a partir de fosfocreatina.