El proceso metabólico de formación de glucosa a partir de aminoácidos (de las proteínas) o de glicerol (de los triglicéridos). En fisiología, medicina y bioquímica, la síntesis de glucosa a partir de fuente no carbohidratada, como son las grasas y las proteínas: tiene lugar cuando las fuentes de glucógeno del hígado se han acabado. La vía es, en esencia, la contraria a la glucólisis, desde el pirúvico a la glucosa, y puede utilizar muchas materias, como los aminoácidos, el glicerol y los intermediarios del ciclo de Krebs. El catabolismo de proteínas y grasas en un grado notable sólo ocurre en circunstancias de gran ayuno o en ciertos cuadros patológicos endocrinos.
La gluconeogénesis es una síntesis de glucosa a partir de fuente no compuesta por hidratos de carbono, como los aminoácidos, el lactato, el piruvato y las grasas. La gluconeogénesis se produce sobre todo en el hígado y los riñones cuando la fuente alimentaria de hidratos de carbono es insuficiente para cubrir la demanda de glucosa del cuerpo.